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樣本類(lèi)型：小鼠肺組織（Lung）、小腸固有層（ small intestine lamina propria, siLP）

抗體方案：

圈門(mén)策略：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

首先通過(guò)FSC-A/SSC-A圈出主細(xì)胞群體，F(xiàn)SC-A/FSC-H去除粘連體，SSC-B-A/SSC-A去除紅細(xì)胞干擾，在活細(xì)胞下圈出CD45+群體，通過(guò)IL-7Rα+lin-圈出總的ILCs（FigA-B）。

在肺組織的總ILCs中，通過(guò)PLZF+IL-18Rα+圈出ILCP（FigC）。

分別在肺組織（FigD）和siLP（FigE）中對(duì)ILC亞群進(jìn)行細(xì)致地劃分：首先通過(guò)RORγ和T-bet雙散點(diǎn)圖區(qū)分出T-bet+ RORγt-、T-bet-RORγt-、T-bet+/-RORγt+三個(gè)群體：

1. 在T-bet+ RORγt-群體下通過(guò)CD49b-ST2-NKP46+IL18Rα+識(shí)別出ILC1細(xì)胞，同時(shí)通過(guò)TRAIL和CD49a可將ILC1繼續(xù)細(xì)分成TRAIL+ILC1細(xì)胞和CD49a+ILC1細(xì)胞；

2. 在T-bet-RORγt-群體下GATA3+可成功圈出ILC2細(xì)胞，繼續(xù)通過(guò)ST2和KLRG1可將ILC2細(xì)胞細(xì)分成KLRG1-ILC2、KLRG1+ILC2和ST2-ILC2;

3. 在T-bet+/-RORγt+去群體下，通過(guò)NKP46和CCR6可將ILC3進(jìn)一步分成NCR+ILC3（NKP46+CCR6-）、NCR-ILC3（NKP46-CCR6-）和CCR6+ LTi-like ILC3（NKP46-CCR6+）。

為了研究小鼠肺組織（FigF）和siLP（FigG）的細(xì)胞因子分泌及增殖情況，使用激活劑和特異細(xì)胞因子對(duì)細(xì)胞進(jìn)行了體外激活培養(yǎng)。經(jīng)過(guò)刺激后，肺組織中的ILC1產(chǎn)生了大量的IFN-γ；siLP中ILC2和ILC3的IL-13和IL-22有明顯的上升趨勢(shì)。

此方案不僅可以對(duì)ILCPs和ILC的3個(gè)亞群進(jìn)行定義，而且可以利用方案中CD11b實(shí)現(xiàn)對(duì)成熟NK細(xì)胞（表型為CD11b⁺NKp46⁺T-bet⁺）研究（FigH）。同時(shí)加入特異性細(xì)胞因子和增殖標(biāo)記物來(lái)分析ILC和NK細(xì)胞的功能特征。全面多維度分析小鼠組織中不同ILCs的表型和功能狀態(tài)的特點(diǎn)，充分展示這個(gè)方案的多樣性和靈活性。

層浪生物近期發(fā)布的新品——全光譜流式細(xì)胞分析儀CytoStellar，作為一種創(chuàng)新性的流式技術(shù)， 它能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)熒光素完整光譜的同步檢測(cè)，通過(guò)光譜指紋識(shí)別，輕松辨別發(fā)射波長(zhǎng)相近的染料，增加熒光素選擇自由度，降低panel設(shè)計(jì)難度；并支持多重自發(fā)熒光自動(dòng)解析，使其能夠提供更全面的熒光信號(hào)及多參數(shù)分析能力，實(shí)現(xiàn)“無(wú)補(bǔ)償”的流式分析。具體優(yōu)勢(shì)如下：

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性能卓越非凡

1.數(shù)據(jù)存儲(chǔ)能力出眾，單文件承載近億事件記錄，近百萬(wàn)分之一稀有細(xì)胞檢測(cè)游刃有余；

2.超寬動(dòng)態(tài)檢測(cè)范圍，輕松應(yīng)對(duì)百萬(wàn)倍熒光強(qiáng)度差異的檢測(cè)需求；

3.光譜流式與傳統(tǒng)流式一鍵切換，兼容性卓越，一機(jī)兩用，靈活便捷。

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檢測(cè)高效強(qiáng)大

1.快速完成96孔板檢測(cè)，加速高通量篩選進(jìn)程，提高工作效率；

2.上樣系統(tǒng)內(nèi)置溫控模塊，實(shí)現(xiàn)溫度連續(xù)可調(diào)，確保各種檢測(cè)樣本狀態(tài)穩(wěn)定如“初”；

3.樣本自動(dòng)回收設(shè)計(jì)，有效避免珍惜樣本資源的浪費(fèi)，節(jié)約成本和樣本制備時(shí)間；

4.適配多種進(jìn)樣裝置，從流式管到96孔和384孔板，一應(yīng)俱全。

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軟件智能易用

1.多層級(jí)數(shù)據(jù)管理，實(shí)驗(yàn)組別管理井然有序；

2.向?qū)讲僮鹘缑妫?jiǎn)化流程，易學(xué)易用；

3.融合多元分析模塊，實(shí)現(xiàn)抗體滴定、細(xì)胞周期擬合等常用實(shí)驗(yàn)一鍵式精準(zhǔn)分析；

4.定時(shí)自動(dòng)開(kāi)關(guān)機(jī)，智能維護(hù)及測(cè)量，即享無(wú)憂(yōu)體驗(yàn)。

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